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CCK-8检测试剂盒使用步骤

更新时间:2024-10-15  |  点击率:137
  CCK-8检测试剂盒的工作原理基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐)在细胞内被脱氢酶还原成橙黄色甲臢产物的过程。细胞增殖越多越快,则脱氢酶还原生成的甲臢产物越多,颜色越深;细胞毒性越大,则细胞死亡越多,颜色越浅。因此,可以通过测定颜色深浅来判断细胞活力或增殖、毒性状态。CCK-8检测试剂盒广泛应用于生物学、医学、药学等领域的研究中,如细胞增殖实验、药物筛选、细胞毒性评估等。
 
  CCK-8检测试剂盒使用步骤:
 
  准备细胞:将待检测的细胞培养至适当密度。
 
  加入CCK-8溶液:按照说明书要求的比例向细胞培养液中加入CCK-8溶液。
 
  孵育:将加入CCK-8溶液的细胞培养板置于适当温度(如37℃)下孵育一定时间(如1-4小时)。
 
  测定OD值:使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的OD值。
 
  注意事项
 
  操作规范:在使用CCK-8检测试剂盒时,应严格按照说明书操作,避免污染和误操作。
 
  细胞状态:细胞的状态和密度对实验结果有重要影响,因此在进行实验前要确保细胞处于良好的生长状态。
 
  孵育条件:孵育温度和时间对实验结果也有影响,应严格按照说明书要求的条件进行孵育。
 
  读数准确性:使用酶标仪测定OD值时,应确保读数准确,避免误差对实验结果的影响。
 
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