周周推荐 | 自主研发Annexin V凋亡检测试剂盒

      Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷酯酰丝氨酸（phosphatidylserine，简称PS）的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光 检测设备进行检测。

检测原理

       凋亡早期，细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（PS）会从膜内翻到膜外，这是凋亡的一个典型特征，细胞凋亡处于早期阶段时，仅有PS外翻，而细胞膜仍然完整，随着凋亡进程的推移，细胞除了PS外翻以外，细胞膜通透性会改变，可以简单的理解成凋亡后期，细胞膜有穿孔的现象。

       Annexin V凋亡检测试剂盒一般包含3个组分：两个染料和一个为Annexin V标记提供钙离子环境的Binding Buffer。Annexin V本质是一个在钙离子环境下，能够与磷脂酰丝氨酸高度特异性结合的膜联蛋白，通过在该蛋白上标记的荧光基团，来标记凋亡细胞，然后再搭配只能够进入受损细胞膜的核酸染料，就可以达到区分各阶段细胞的目的了。

细胞分为三类：一是无PS外翻，也没有细胞膜破裂的健康细胞（两个染料都染不上），二是处于早期凋亡，有PS外翻但是细胞膜完好的细胞（可以染上Annexin V-FITC，不能染上PI），三是处于晚期凋亡阶段，既存在PS外翻，也存在细胞膜破裂的晚期凋亡细胞（两种染料均可染上）。染完色后通过流式细胞仪，就能够对细胞群体进行定量和分析了。

Bioss Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒介绍

产品特点

Bioss自主研发产品，染色效果优于国际高价格品牌！
调亡细胞群分群清晰，且细胞群集中！
不同检测方案，信号更强更灵敏！
操作简便，省时又省力，加入PI 后5min可直接上机检测！

BA00101检测数据

A. 流式细胞仪分析：

AF488最大激发波长为488nm，最大发射波长519nm；PI-DNA复合物的最大激发波长为 535nm， 最大发射波长为615nm。用CellQuest等软件进行分析，绘制散点图，AF488为横坐标，PI为纵坐标。典型实验中的细胞可以分成三个亚群，活细胞仅有很低强度的自发荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色及红色荧光双重染色。

B. 荧光显微镜分析：

悬浮细胞：滴一滴用 AnnexinV-AF488/PI 双染的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞。

贴壁细胞：可直接用盖玻片培养细胞并诱导细胞凋亡。

在荧光显微镜下用双色滤光片观察。早期凋亡细胞仅有绿色荧光信号，晚期凋亡细胞有绿色及红色荧光双重染色。

Annexin V单染(左)、PI单染(中)、Annexin V/PI双染(右)

Bioss产品与国际品牌检测结果对比示例

Protocol:

Jurkat 细胞生长至对数生长期时，分别经过紫外诱导0秒、15秒、30秒后，继续培养4h后加入Annexin V-FITC / PI检测。

Result：

Bioss

e品牌

k品牌

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