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2022
12-9(一)获得目的基因1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。(二)构建重组表达载体1、荧光素标记的生物素载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载...
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12-82022
12-2背景资料人绒毛膜促性腺激素(HumanChorionicGonadotropin,HCG)是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,由α和β两个亚基组成的异源二聚体。α亚基与垂体分泌的黄体生产素(LH)、促卵泡激素(FSH)和促甲状腺激素(TSH)相似,β-亚基是HCG所特异的结构。HCG的主要功能是刺激黄体,有利于雌激素和黄体酮的持续分泌,促进子宫蜕膜的形成,使胎盘生长成熟。受精卵在子宫内着床后,由胚胎发育为胎儿的过程中,胎盘的滋养层细胞产生大量的HCG,HCG可通过血液循环排...
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12-2背景资料促黄体激素(Luteinizinghormone,LH)也叫黄体生成素、促间质细胞激素,是腺垂体前叶细胞分泌的一种糖蛋白类促性腺激素,由α和β两条多肽组成的异源二聚体,存在于人的血液和尿液中。对于女性来说,LH与促卵泡刺激素(FSH)共同作用促进卵泡成熟与排卵,使卵泡破裂形成黄体,并分泌雌激素和孕激素。LH的产生受下丘脑促性腺释放激素的控制,同时受卵巢的正、负反馈调控。对于男性来说,LH的作用是促进睾丸间质细胞的发育及睾酮的分泌。男性LH的正常值为1.24-8.62m...
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11-30WesternBlot虽然是科学研究中很基础平常的实验,但想得到一个好的WB结果却相当困难。WB的操作步骤十分琐碎,需要注意的细节也很多。漂亮的WB结果几乎算得上是高分文章的标配,能为文章增色不少。工欲善其事必先利其器,Bioss现为您提供分类细致、专业全面的《WB全套试剂选择指南》,助您产出WB结果,在科研道路上驰骋前行!WB配套试剂表※产品信息以为准。WesternBlot全套试剂优势:全:品种完善,涵盖WB相关的全线产品,无须担心产品兼容问题,一次性购买齐全。快:产品使...
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11-30背景资料降钙素原(PCT,Procalcitonin)是激素降钙素(CT)的肽类前体,由116个氨基酸组成,分子量大约13kDa的蛋白。PCT由神经内分泌细胞(甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞)分泌产生。在正常情况下,CT-mRNA在内质网内翻译成141个氨基酸残基的降钙素原前体(Pre-PCT),分子量约为16kDa,后经一系列水解酶作用最终形成一个含57个氨基酸的N末端多肽、降钙素和羧基端钙抑肽。健康人的血清中PCT含量极低,其值通常<0.05ng/mL。PCT浓度的升高可能...
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11-29背景资料前列腺特异性抗原(Prostate-specificantigen,PSA)是主要由前列腺上皮细胞产生的蛋白分解酶,分子量约为33-35kDa,具有丝氨酸蛋白水解酶活性。正常情况下PSA被分泌入前列腺液或精液中,以有活性的游离形式(FPSA)存在。PSA在血液中的含量极其微少,只有当前列腺组织发生炎症或癌变的时候,血清中的PSA才会升高。血清中的PSA主要以结合形式(CPSA)存在,通常以FPSA与CPSA的和即总PSA(TPSA),代表血清总的PSA水平。PSA参与...
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11-29背景资料血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),又称血管通透因子(Vascularpermeabilityfactor,VPF),是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子,其家族成员有VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和PIGF。VEGF-A(VEGF)基因由8个外显子组成,选择性剪接产生10种以上亚型。包括VEGF121、VEGF145、VEGF148、VEGF183、VEGF165、V...
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