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2022
11-29都说“实验虐我千百遍,我待实验如初恋”,咱科研er早就看淡失败了,甚至还能从失败中吸取点小经验优化下小方案。但是!因为污染而导致的实验失败,就太让人头疼了,浪费样本浪费时间精力,甚至还影响健康,属实是百害而无一利。这么多污染防不胜防怎么办?别怕,Bioss实验室污染清除全套试剂,让污染无处遁形。1支原体污染支原体污染是细胞培养过程中较常见污染之一,保守估计常规细胞培养中有15–35%存在支原体污染。支原体生长缓慢,不会马上使细胞死亡,但会影响细胞内的各种参数,例如部分支原体会...
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11-29背景资料β2微球蛋白(β2Microglobulin,β2-MG)由99个氨基酸组成的内源性低分子量血清蛋白,分子质量为11.8kDa,由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生。β2-MG是人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类的β链(轻链),含有链内二硫键的单个多肽链。β2-MG广泛存在于血浆、尿液、脑脊液、淋巴细胞及血小板等表面,量极微。正常人中,β2-MG以相对恒定的速度合成,并被释放到体液内,血清β2-MG极易通过肾小球滤过膜,滤过的β2-MG几乎被肾近曲小管细胞重吸收和降解,不会...
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11-29背景资料催乳素(Prolactin,PRL)又叫泌乳素、促乳素,是一种由垂体前叶合成并分泌的多肽类激素,由199个氨基酸残基组成。PRL在体内有多种分子质量的存在形式,最常见的为22kDa,还有16kDa等,不同形式的催乳素与不同PRLR(催乳素受体)结合。PRL的主要作用为促进机体乳腺上皮细胞的增值和分化,促进乳汁合成。一般情况下,健康成年人的血PRL低于25ng/mL,且大多数会更低,低于20ng/mL。催乳素的分泌受下丘脑的催乳素释放因子(促甲状腺激素释放激素、血管紧张...
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11-29背景资料铁蛋白(Ferritin,FER)是机体内贮存铁和维持细胞铁平衡的一种可溶组织蛋白。铁蛋白由蛋白质外壳(去铁蛋白)和铁核心组成,去铁蛋白一般为外径约12nm,空囊腔径长约8nm的球形笼状结构。去铁蛋白通常由24个亚基组成,每个单位包括两种亚基:H亚基(重链,主要在心脏)和L亚基(轻链,主要在肝脏),其中H型亚基(FerritinHeavyChain,FHL)分子量为22kDa,与中和游离铁及抗炎有关;L型亚基(FerritinLightChain,FTL)分子量为19...
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11-26生物链霉亲和素是与亲和素(avidin下称AV)有相似生物学特性的一种蛋白质,是streptomycesavidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。生物链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10mol/L数量级,这一性质常用于分子生物学用途。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基...
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11-23His标签抗体是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。然而,目前商品化His-tag的单克隆抗体(mAb)种类不多,且价格也十分昂贵。如何选择合适的His标签抗体...
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11-17某些荧光物质在一定条件下,羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒既能与抗原或抗体结合。又不影响抗原与抗体的特异性结合。用荧光抗原或荧光抗体对待检标本染色后,在荧光显微镜下观察,可看到发出荧光的抗原抗体复合物。作为蛋白质标记用的荧光物质需具备如下条件:①有与蛋白质分子形成稳定共价键的化学基团,但不形成有害产物;②荧光效率高,与蛋白质结合的需要量少;③结合物在一般条件下稳定,结合后又不影响免疫活性;④作为组织学标记,结合物的荧光必须与组织的自发荧光有良好的反衬;⑤结合程序简单,...
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11-12荧光抗体操作过程为何要避光?(1)生物化学反应需要酶的催化作用,所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光.ATP是生命活动能量的直接来源,发光强度与ATP的含量成正比,所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量。(2)影响酶活性的外界因素有温度和pH,其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液.分光光度计反应室内发生的能量转换是ATP中活跃的化学能转化为光能。(3)荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,由于受ATP数量限制,发光强度也不再增加。(4)每个...
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